生物活性
产品描述 ZM-447439 是Aurora 选择性ATP竞争性抑制剂,作用于Aurora A激酶和Aurora B 激酶时,IC50 分别为110 nM 和 130 nM。
靶点 Aurora A Aurora B 激酶
IC50 110 nM 130 nM [1]
体外研究 体外, ZM-447439 选择性抑制重组人类Aurora A和B,IC50分别为110和130 nM,而抑制其他不同结构类型蛋白激酶，包括有丝分裂激酶CDK1和PLK1时，IC50>10 μM。 [1] Aurora 激酶抑制剂, ZM-447439 抑制BON, QGP-1和MIP-101三种细胞系生长，连续处理72小时，IC50分别为3 μM , 0.9 μM 和3 μM，这种作用存在时间和剂量依赖性。此外, ZM-447439通过促进DNA分裂和 caspase 3 和7激活,有效诱导细胞凋亡，且使GEP-NET细胞在G0/G1期和G2/M期停顿。[2] 在小鼠胚胎中, ZM-447439 抑制Aurora 激酶,通过在每个胚胎周期使用不同干扰，调节G2到中期的组蛋白H3 serine 10 (H3S10Ph)而使前两次分裂发生异常。[3] 最近研究显示ZM-447439作用于宫颈癌SiHa细胞，抑制生长和凋亡，且增强对Cisplatin的化学敏感性。[4]
推荐的实验操作
激酶实验:  
体外激酶实验 使用杆状病毒表达体系，表达重组Aurora A和B作为氨基末端His6标记融合蛋白。使用Ni-NTA琼脂糖，通过亲和层析纯化Aurora A，使用CM Sepharose Fast Flow，通过离子交换层析纯化Aurora B。1 ng 纯化的重组酶加到反应中，反应中含 25 mM Tris-HCl, pH 7.5, 12.5 mM KCl, 2.5 mM NaF, 0.6 mM DTT, 6.25 mM MnCl2, 10 μM 肽底物, 10 μM ATP（Aurora A），5 μM ATP（Aurora B）, 和0.2 μCi γ[33P]ATP (比活≥2,500 Ci/mmol), 然后在室温下温育60分钟。加入20% 磷酸反应终止，使用P30硝化纤维过滤器获得产物， 使用Beta 板TM计数器测定33P摄入率。
细胞试验: [2]
细胞系 BON, QGP-1和MIP-101
浓度 0到5 μM
处理时间 72小时
方法 通过结晶紫染色测评细胞数。细胞接种在96孔板上，与1% 戊二醇混合。细胞用0.1% 结晶紫染色。用水冲洗未结合的染料。用0.2% Triton X-100溶解结合的结晶紫。使用ELISA读数器在570 nm处分析线性增加的细胞数。
化学数据
稳定性 2年 -20°C粉状
2周4°C溶于DMSO
6月-80°C溶于DMSO